Introducción:

El cáncer es resultado de cambio genéticos y epigenéticos que activan proto-oncogenes e inactivan genes tumor-supresores. La hipótesis de Knudson propone que durante la transformación neoplásica una clona inactiva ambas copias de los genes tumor-supresores afectados en eventos separados (doble hit). Específicamente, en el cáncer de colon, el compromiso de los dos alelos del gen tumor-supresor SMAD4 suele ser un paso crucial de la oncogénesis.

Metodología:

Tras consentimiento informado, se obtuvo tejido tumoral, tejido adyacente no neoplásico y sangre periférica tras resección quirúrgica de un adenocarcinoma de colon de una paciente femenina de 16 años. Se purificó ADN genómico de las muestras y se llevó a cabo secuenciación del exoma y mapeo óptico del tejido neoplásico.

Resultado(s):

La secuenciación del exoma reveló una deleción con corrimiento del marco de lectura de cinco pares de bases en el último exón del gen SMAD4 (NM_001407041.1:c.1609_1613del, NM_005359.6: p.Asp537SerfsTer38). Esta deleción reemplaza los últimos 16 residuos de SMAD4 por 38 residuos distintos. Un ensayo ARMS mostró ausencia de la deleción en tejidos no neoplásicos. El mapeo óptico reveló rearreglos que incluyen pérdida de copias de todo el brazo largo del cromosoma 18 (59, 473,143 pb), que incluye a SMAD4.

Conclusion(es):

Dado que la deleción de 5 pb no crea un codón de paro prematuro, el transcrito no experimenta degradación NMD y la proteína mutante es sintetizada. Los residuos reemplazados son cruciales para la heterotrimerización de SMAD4 con moléculas de R-SMAD para la transducción de la vía TGF-β. Actualmente los métodos genómicos permiten comprobar la hipótesis de Knudson.